全自動定氮儀的原理以及特點
點擊次數(shù):1928 發(fā)布時間:2017-08-01
蛋白質(zhì)含量測定方法是生物化學(xué)研究中zui常用、zui基本的分析之一。目前常用的方法有全自動定氮儀法(Kjedahl、雙縮脲法(Biuret)、紫外吸收法、考馬斯亮藍法(Bradford)。其中Bradford法靈敏度zui高比紫外吸收法靈敏10~20倍Biuret法靈敏100倍以上。 凱氏定氮法雖然比較復(fù)雜但較準(zhǔn)確往往以定氮法測定的蛋白質(zhì)作為其他方法的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)。
原理:自動定氮儀法測定蛋白質(zhì)分為樣品消化、蒸餾、吸收和滴定4個過程。其原理是樣品中含氮有機化合物與濃在催化劑作用下共熱消化,含氮有機物分解產(chǎn)生氨,氨又與 — 作用,變成銨。然后加堿蒸餾 放出氨,氨用過量的硼溶液吸收,再用鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定求出總氮量換算為蛋白質(zhì)含量。
特點:
凱氏定氮法是目前分析有機化合物含氮量常用的方法,是測定試樣中總有機氮zui準(zhǔn)確和zui簡單的方法之一,被國內(nèi)作為法定的標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法。該凱氏定氮法適用范圍廣泛,用于標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的準(zhǔn)確測定,干擾少,干擾是非蛋白氮可用三乙沉淀蛋白質(zhì)而分離測定結(jié)果準(zhǔn)確,重現(xiàn)性好,但操作復(fù)雜費時,試劑消耗量大。費時太長,通常8-10個小時,靈敏度低,測定范圍是0.2-1.0mg。
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