淺述液相色譜儀裝柱方法的選擇
點擊次數(shù):920 發(fā)布時間:2021-11-01
液相色譜儀是一款高效、功能強大的模塊化制備色譜系統(tǒng),其改進了中草藥活性成分、化學合成和生化藥物分離中的純化過程,允許使用多達4種不同的溶劑的梯度洗脫,實現(xiàn)在線檢測,支持不銹鋼色譜柱和高壓玻璃色譜柱的系統(tǒng)連接,廣泛應用于中草藥天然產(chǎn)物、有機合成產(chǎn)物和蛋白質(zhì)生物高分子等目標活性成分的分離純化和制備,從實驗室研究到工業(yè)化生產(chǎn),均可滿足其要求。
液相色譜儀利用外力,含有樣品的流動相(氣體、液體)通過固定在柱或平板上的固定相表面,該固定相與流動不相溶。當流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時,混合物中的組分與固定相相互作用。
下面要為大家介紹的是液相色譜儀裝柱方法的選擇:
根據(jù)固定相顆粒度和柱子的尺寸,采用不同的裝柱方法,往往裝填越好分離效果越好。裝柱效果跟填料的顆粒度關系很大,顆粒度的減少會導致裝柱的難度。一般來說,顆粒直徑小于20-30um的固定相采用濕法裝填。所謂“敲擊-裝填”技術適用于顆粒直徑大于25um的固定相。濕法的目的是迫使相對稀松的固定相懸漿以高速裝入色譜柱子,從而減少空隙的形成。然而,當柱直徑大于20mm,所加壓力為30-40bar時,高壓懸漿裝填技術就變得十分復雜。
為將小顆粒固定相裝入更大的制備型色譜柱,可采用柱長壓縮技術。這種方法,先將固定相懸漿(或偶爾是干填充物)裝入柱中加壓,利用物理方法將其壓緊。壓緊的方法有兩種:徑向壓縮和軸向壓縮。濕法裝柱需要一定的設備,在柱子填完后,應用有柱效的測量,對柱效低的柱子應該重填。
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